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差速离心法 北利离心机厂

发布时间:2018-8-20 11:20:44  发布者: 北京时代北利离心机有限公司

    差速离心法指分步改变离心转速或向速崎低速离心交替进行,选用大小不向的离心力使具备不同质量、不同沉降系数的微小颗粒(粒子或大分子)从混合的悬浮液中分批沉降而进行分离的力法。该方法适用于在悬浮液中的样品颗粒之间重量存在较大差别,更准确地说是沉降系数的差别在一个到几个数量级的混合样品的分离。重量或S值的差别越大,分离的效果越好。对于差别较小的颗粒,差速离心法就很难得到满意的分离效果。这种离心方法是通过得到沉淀或得到除去大的颗粒后的上清液来进行分离、提取。该方法又称差速沉淀法。
    差速沉淀离心一般采用角转子。在离心开始时,所有颗粒都均匀地分布在整个离心管中,离心期间各种颗粒以不问速度向管底沉降,纤过一定时间,zui重的或S值zui大的顾粒全部沉别管底,得到不合这种颗粒的上清液。将上清液进一步以更高转速离心一定时间,又对得到次轻的颗粒,逐渐增加离心转速就可以分步得到不同质量、不同S值的颗粒样品,达到分离的目的。
    但是每次得到的沉淀并不均一,这是由于各种大小和密度的颗粒的离心管中均匀分布,经一定时间离心后全部zui重的颗粘达到管底时,离心开始时离管底较近处的较轻颗粒也沉到管底而混于该重颗粒之中,所以还要将沉淀再悬浮,以原来的转速再次离心,获得的沉淀将更加“纯”一些,这样反复几次就可以得到基本上大小均一的“纯”样品。这个过程称为“洗”沉淀。将每次洗过的上清液合并起来以更向转速离心,从上清液或沉淀得到分离提纯的另一组分。
    差速离心常用来分离各种化细胞器从粗提核酸、蛋白质。例如组织勾浆可根据它们的S值大小与具他组分提山来。这种方法将zui初的沉淀反复地悬浮和离心2—3次就能得到一个相对纯的亚细脑组分,但得到的纠分也不是绝对均一,可以进一步用一种连续的液体密度梯度代替均匀的悬浮介质,从而得到一个更好的分离。

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